烟曲霉过敏原的鉴定-与哮喘肺损伤的潜在关联
2024/10/25
摘要
背景：与粗提取物相比，成分分辨诊断允许检测 IgE 致敏性，具有可重复性和标准化的优势。传统的过敏原鉴定方法，即 1 维或 2 维蛋白质印迹和用患者的 IgE 筛选表达 cDNA 文库的主要缺点是不一定能维持蛋白质的天然结构。
方法：我们使用一种新的免疫沉淀技术结合质谱法来鉴定烟曲霉的新过敏原，使用磁性 Dynabeads偶联抗人 IgE 抗体，纯化人血清 IgE，随后从烟曲霉蛋白提取物中纯化过敏原。
结果：在后续的质谱肽指纹分析中检测到184种蛋白质，其中13种亚型被重组表达并纯化。在52名A. fumigatus致敏的哮喘患者、23名非真菌致敏的哮喘患者和18名健康人中，只有前者通过免疫印迹和/或酶联免疫吸附试验（ELISA）显示出IgE反应。我们发现了11种尚未描述为A. fumigatus过敏原的蛋白质，其中果糖-1,6-二磷酸醛缩酶II类（FBA2）（33%）、NAD依赖性苹果酸脱氢酶（31%）和Cu/Zn超氧化物歧化酶（27%）是最常见的。就这三种过敏原而言，原生与变性蛋白质检测表明对原生蛋白质的识别更好。11种过敏原中的7种符合世界卫生组织/国际免疫学会联合会（WHO/IUIS）的标准，并被接受为新的A. fumigatus过敏原。
结论：我们介绍了一种通过免疫沉淀结合质谱法从复杂的过敏源（如烟曲霉）中鉴定过敏原的直接方法，该方法比通过保持蛋白质结构来鉴定过敏原的传统方法更具优势。
文献来源：Identification of allergens from Aspergillus fumigatus-Potential association with lung damage in asthma. Eva-Maria Rick, et al. Allergy. 2024 Feb 9. doi: 10.1111/all.16032. Online ahead of print. PMID: 38334146
背景：与粗提取物相比，成分分辨诊断允许检测 IgE 致敏性，具有可重复性和标准化的优势。传统的过敏原鉴定方法，即 1 维或 2 维蛋白质印迹和用患者的 IgE 筛选表达 cDNA 文库的主要缺点是不一定能维持蛋白质的天然结构。
方法：我们使用一种新的免疫沉淀技术结合质谱法来鉴定烟曲霉的新过敏原，使用磁性 Dynabeads偶联抗人 IgE 抗体，纯化人血清 IgE，随后从烟曲霉蛋白提取物中纯化过敏原。
结果：在后续的质谱肽指纹分析中检测到184种蛋白质，其中13种亚型被重组表达并纯化。在52名A. fumigatus致敏的哮喘患者、23名非真菌致敏的哮喘患者和18名健康人中，只有前者通过免疫印迹和/或酶联免疫吸附试验（ELISA）显示出IgE反应。我们发现了11种尚未描述为A. fumigatus过敏原的蛋白质，其中果糖-1,6-二磷酸醛缩酶II类（FBA2）（33%）、NAD依赖性苹果酸脱氢酶（31%）和Cu/Zn超氧化物歧化酶（27%）是最常见的。就这三种过敏原而言，原生与变性蛋白质检测表明对原生蛋白质的识别更好。11种过敏原中的7种符合世界卫生组织/国际免疫学会联合会（WHO/IUIS）的标准，并被接受为新的A. fumigatus过敏原。
结论：我们介绍了一种通过免疫沉淀结合质谱法从复杂的过敏源（如烟曲霉）中鉴定过敏原的直接方法，该方法比通过保持蛋白质结构来鉴定过敏原的传统方法更具优势。
文献来源：Identification of allergens from Aspergillus fumigatus-Potential association with lung damage in asthma. Eva-Maria Rick, et al. Allergy. 2024 Feb 9. doi: 10.1111/all.16032. Online ahead of print. PMID: 38334146
（中国医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科 吴坤 苏新明）
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